甘肅褐藻寡糖婦科抑菌凝膠
海藻提取物在作為綜合作物營養(yǎng)劑方面受到普遍關(guān)注(NorrieandHiltz,1999),而褐藻酸和褐藻寡糖(AOS)是其中的重要組成部分(Zhangetal.,2019)。褐藻酸由α-L-古羅糖醛酸(G)和β-D-甘露糖醛酸(M)通過1-4糖苷鍵連接(邰宏博等,2015),由于其分子量大,性質(zhì)不穩(wěn)定等特點(diǎn),因此應(yīng)用范圍較小(孫哲樸等,2019)。褐藻寡糖是褐藻酸的降解產(chǎn)物,聚合度一般為2-10,可由生物法、化學(xué)法、物理法等方法制備得到。褐藻寡糖具有分子量低、性質(zhì)穩(wěn)定、水溶性強(qiáng)、安全無毒等特點(diǎn),在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、生活日用等方面有更廣闊的應(yīng)用空間(王媛媛等,2010)。如:施用3%的褐藻寡糖可提高小麥種植中氮肥的利用率,進(jìn)而提高小麥的產(chǎn)量和品質(zhì)(張朝霞等,2014b);在水稻培育中施用效提高水稻蛋白質(zhì)等含量,同時(shí)提高產(chǎn)量(張運(yùn)紅等,2016);在玉米培育中施用,可明顯提高玉米的肥料利用率和產(chǎn)量(張朝霞等,2013)。此外,在土壤修復(fù)和抗污染方面(張朝霞等,2014a;余勁聰,2016)、水果保鮮方面(藍(lán)炎陽等,2013;陳鋒,2014)均有重要應(yīng)用。較低濃度的褐藻寡糖能促進(jìn)高粱種子萌發(fā)及幼苗生長,提高高粱葉片葉綠素的合成速率。甘肅褐藻寡糖婦科抑菌凝膠
褐藻寡糖對CAT活性的影響植物遭受低溫傷害時(shí),過氧化氫酶系統(tǒng)首先受到破壞損傷,造成體內(nèi)過氧化氫去除鏈條斷裂、積累增加,由于過氧化氫積累可以嚴(yán)重?fù)p害植物細(xì)胞膜和其它代謝酶類,因此CAT活力能夠反映植物去除過氧化氫能力強(qiáng)弱和植物遭受損程度大小。圖6為煙C葉片CAT活力變化。由圖可知,水處理組在低溫脅迫后,短時(shí)間內(nèi)CAT活力迅速下降,隨著時(shí)間延長,植物體內(nèi)抗逆反應(yīng)啟動(dòng),會增加CAT生成以去除積累的過氧化氫,因此CAT含量又緩慢升高。噴施寡糖后進(jìn)行低溫脅迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO組中煙CCAT活力變化規(guī)律相似:短時(shí)間內(nèi)均能夠誘導(dǎo)煙CCAT活力迅速升高,12h達(dá)到高峰,且峰值都高于空白對照,隨著時(shí)間延長,CAT活力又緩慢下降,以0.20%褐藻寡糖的誘導(dǎo)效果好;0.10%褐藻寡糖處理組在6~24h之內(nèi)CAT含量與對照相比變化較小,但48h煙C葉片CAT活力迅速下降,說明CAT受到破壞而活力降低。高濃度1.00%褐藻寡糖組經(jīng)過相同時(shí)間低溫脅迫,其CAT活力均低于水處理組,說明1.00%褐藻寡糖對煙C產(chǎn)生了毒副作用,加劇了煙C葉片損傷。安徽褐藻寡糖大師褐藻寡糖誘導(dǎo)植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對植物造成的損傷,從而達(dá)到抗逆的目的。
馬尾藻是我國南海常見的大型經(jīng)濟(jì)褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產(chǎn)物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對制備的褐藻多糖及寡糖進(jìn)行純化、結(jié)構(gòu)分析和活性評價(jià)。研究結(jié)果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應(yīng)面優(yōu)化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時(shí)間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質(zhì)量分?jǐn)?shù)3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達(dá)到81.93%,多糖保留率92.17%;優(yōu)化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時(shí),脫色率達(dá)到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對初步純化后的多糖進(jìn)一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個(gè)多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產(chǎn)褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發(fā)酵制備粗酶液,發(fā)酵液酶活為15.20U/ml。
低溫逆境時(shí),寡糖處理能迅速增強(qiáng)其抗逆酶類,對引起細(xì)胞損傷的物質(zhì)進(jìn)行去除,提高植物的抗逆能力。干旱逆境,通過寡糖作用,能夠使其體內(nèi)的抗旱指標(biāo)明顯增強(qiáng),如ABA的含量升高明顯,對干旱下植株的生長狀態(tài)進(jìn)行調(diào)控,降低干旱脅迫對植株的損傷,達(dá)到誘導(dǎo)抗旱的目的??共⌒阅艿奶岣撸ㄟ^檢測煙C花葉病毒和病對植株的致病作用。對煙C花葉病毒,通過將寡糖作用于病毒與植株的侵染過程、體內(nèi)復(fù)制階段進(jìn)行誘導(dǎo)抗病毒研究,發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖可以明顯提高植株的抗病毒能力,同時(shí)還能直接作用于病毒,在體外對其進(jìn)行鈍化,降低傳染幾率,達(dá)到抗病毒的效果。體外和體內(nèi)兩條途徑對病菌進(jìn)行抗病能力的檢測,發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖不能抑制病菌的生長,而是通過提高植株的體內(nèi)抗逆酶類,達(dá)到抗病的效果,其對煙C病的比較好防效為4d,比三唑酮的比較好防效減少了2d,縮短了病的治好時(shí)間,降低了煙C的損傷。對植物果實(shí)的抗病保鮮的研究,發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖能夠改變草莓的呼吸過程,減少水分散失,降低外界對其造成的損傷。因此褐藻寡糖對植物的抗逆機(jī)制是通過誘導(dǎo)作用實(shí)現(xiàn)的。誘導(dǎo)植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對植物造成的損傷,從而達(dá)到抗逆的目的。褐藻寡糖作為一種信號分子,還參與調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育能調(diào)控生物合成過程從而保護(hù)果實(shí)品質(zhì)提高果實(shí)的產(chǎn)量。
褐藻寡糖對煙C葉片細(xì)胞膜低溫?fù)p傷程度的影響 丙二醛MDA含量和細(xì)胞電滲率大小是植物細(xì)胞膜損傷程度的重要指標(biāo) ,在低溫環(huán)境中 ,植物受到損傷后,細(xì)胞膜受到破壞, MDA和細(xì)胞電滲率都有不同程度升高 。經(jīng)過低溫脅迫6h后, 水處理(ADO 濃度為 0)組MDA含量和電滲率分別增加了4 .9倍和1 .5倍 ,隨著低溫脅迫時(shí)間延長,MDA和電滲率仍繼續(xù)增加, 這是因?yàn)殡m然煙C葉面覆蓋有水層, 能夠減小葉面溫差變化 ,減輕低溫對葉片傷害,但并不能完全阻止凍害發(fā)生, 因此煙C胞內(nèi)物質(zhì)不斷滲漏, 隨低溫處理時(shí)間延長細(xì)胞損傷不斷加劇 。噴施寡糖后進(jìn)行低溫脅迫, 0 .05 %~ 0 .30 %ADO 處理組 MDA 和電滲率相比同一時(shí)刻水處理組都有不 同程度下降 ,說明能夠減少細(xì)胞膜損傷, 降低胞內(nèi)物質(zhì) 外滲, 但經(jīng) 0 .10 %ADO 處理的煙C在 48 h 時(shí) MDA 和 細(xì)胞電滲率明顯升高。經(jīng)1 .00 %ADO 處理后進(jìn)行低溫脅迫 ,短時(shí)間內(nèi) MDA 含量和電滲率都劇烈增加, 隨著時(shí)間延長不斷上升 ,說明此濃度ADO加重了煙C葉片傷害 ,可能是由于較高濃度 ADO 溶液對煙C葉片形成較強(qiáng)滲透勢, 造成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)滲出 ,破壞了細(xì)胞正常 結(jié)構(gòu) ,在低溫下更加劇了煙C葉片損傷。褐藻寡糖分子量低,水溶性強(qiáng),穩(wěn)定性高,具有很多生物活性,如抗瘤、抑菌、抗逆性等。上海褐藻寡糖檢測方法
褐藻寡糖羧基的酯化度在植物細(xì)胞誘導(dǎo)反應(yīng)中也發(fā)揮了作用將其開發(fā)為具有獨(dú)特藥理療效和具有保健功能的食品。甘肅褐藻寡糖婦科抑菌凝膠
植物在生長發(fā)育的過程中會遭受多種病害的脅迫,造成產(chǎn)量和品質(zhì)下降。植物免疫誘抗劑又稱“植物疫苗”,可以通過誘導(dǎo)植物自身的免疫系統(tǒng)激發(fā)防御應(yīng)答反應(yīng),增強(qiáng)植物抗病性;且能減少化學(xué)農(nóng)藥的使用,降低對人和環(huán)境的危害。寡糖類誘抗劑是一類具有生物調(diào)節(jié)功能的碳水化合物,能在較低的濃度下被植物細(xì)胞表面的免疫識別受體所識別進(jìn)而激發(fā)PTI,誘導(dǎo)植物產(chǎn)生一系列的免疫應(yīng)答,增強(qiáng)植物的抗病能力。前期,我們利用褐藻膠裂解酶Aly2降解褐藻膠得到褐藻膠寡糖。在此基礎(chǔ)上,以本氏煙和擬南芥為供試植物,以馬鈴薯X病毒、煙C花葉病毒和致病疫霉為防治對象,對AOS在誘導(dǎo)植物抵抗病害過程中發(fā)揮的作用及其分子機(jī)制進(jìn)行研究。甘肅褐藻寡糖婦科抑菌凝膠
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